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多肽合成

多肽是一种与生物体内各种细胞功能都相关的生物活性物质,它的分子结构介于氨基酸和蛋白质之间,是由多种氨基酸按照一定的排列顺序通过肽键(—NH—CO—)结合而成的化合物。由两个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫做二肽,同理类推还有三肽、四肽、五肽等,一直到九肽。通常由10~100个氨基酸分子脱水缩合而成的化合物叫多肽。多肽定制服务:指根据客户的需要,如序列、纯度、分子量、盐成分等的不同要求,进行合成,满足客户特定需要的多肽合成服务。通过质谱仪进行分子量的确认,确定粗品MS正确,再将粗品通过高效液相色谱系统进行纯化,然后浓缩、冻干,得到粉末状精品肽。

多肽合成

公司采用高效液相色谱系统,利用反向C18填料的制备柱,进行分离纯化。
分以下几个步骤:
1)鉴别:取少量多肽粗品,送质谱确认是否含有目标多肽(是,经过分析色谱确认其目标多肽在C18柱的保留时间,即出峰时间;否,重新合成多肽粗品)
2)溶解:使用超声波辅助溶解,一般选择90%水+10%乙腈(甲醇或异丙醇)。难溶,根据多肽序列中酸碱氨基酸的比例,碱性氨基酸比例大,则选择加入适当醋酸或三氟乙酸助溶;酸性氨基酸比例大,则选择加入适当氨水助溶。不溶,疏水性氨基酸比例大,则选择加DMSO(二甲基亚砜)。
3)过滤:将溶解好的粗品液体,通过0.45微米的滤膜过滤(目的保护制备柱)后,待用。
4)上样:利用高效液相制备系统,将液体样品输入制备柱中。
5)洗脱:根据1)得出洗脱梯度,利用不同长度多肽极性强弱差异,分离多肽中的杂质片段。
使用高效液相色谱系统的优点:分辨率高于其他色谱法;所使用的C18制备柱,具有柱效高,使用寿命长,重现性好,可以反复使用;速度快,效率高,每个样品可以在十几分钟或几十分钟内完成纯化;反相色谱应用广泛,技术方面也比较成熟,几乎对各种类型的有机化合物都具有良好的选择性

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